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斑马鱼药物毒理学评价技术已经通过了美国FDA和欧洲EMA的GLP认证,中国也已将斑马鱼模型的研究列入“重大新药创制”专项。利用斑马鱼进行毒性和安全性评价具有可靠、快速的优点,能同时看到各个器官的影响。
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我们检测过敏有两种方法。1. 类胰蛋白酶的含量:用酶标仪检测类胰蛋白酶的含量。2. 肥大细胞数量:制作病理切片,经过过碘酸雪夫染色,肥大细胞呈蓝色,肥大细胞释放的组胺和白三烯等物质呈红色。
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经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用抗炎药组侧线上中性粒细胞数量与正常对照组数量相当,未出现模型对照组中性粒细胞募集情况,且TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症因子明显下调
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实验结束后,以各浓度组织器官反应及死亡情况的统计学分析结果评价药物对斑马鱼的毒性,并对典型毒性器官进行拍照。
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免疫毒性指标有3个:(1)应用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼,观察中性粒细胞数量;(2)应用转基因巨噬细胞绿色荧光斑马鱼,观察巨噬细胞数量(荧光强度);(3)注射红色荧光微球,巨噬细胞吞噬微球排出体外
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经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用抗血栓药物组的与模型对照组比较,心脏红细胞明显增多、血管直径明显增大、血流速度明显加快。本实验证实了阿司匹林和二十五味珍珠片具有显著的抗血栓作用。
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