中山大学附属第一医院何伟玲/王子洋团队、广州大学王雄军团队、珠海市人民医院陆骊工团队联合在Science Advances发表题为 ACSL6-activated IL18R1-NF-κB promotes IL18-mediated tumor immune evasion and tumor progression 的研究论文。研究发现ACSL6在肝癌发病机制中是一个潜在的适配器，激活IL- 18-NF - κB轴介导的肿瘤免疫逃避，为开发有效的癌症免疫治疗策略提供了有价值的见解。

肝癌是世界上第六大常见的癌症，由于其高复发和高转移率，导致肝癌患者的总体生存率较差。免疫检查点抑制剂（ICIs）已成为晚期肝癌的主要治疗药物，然而，只有20%至30%的肝癌患者对免疫治疗有反应。近期研究表明，IL-18信号的异常激活调节肿瘤的免疫逃避和进展，但其潜在机制尚不清楚。长链酰基辅酶A （CoA）合成酶（ACSLs）由ACSL1、ACSL3、ACSL4、ACSL5和ACSL6五种异构体组成，是催化脂肪酸活化的第一步，促进随后的脂肪酸分解代谢和合成代谢的关键酶。大量研究表明，ACSL上调与肿瘤进展有关，但具体作用机制有待进一步探究。

1、ACSL6通过与IL-18R1形成复合物激活IL-18-IL-18R1-NF-κB通路

首先，作者明确了ACSs在肝癌中的功能，发现ACSL6在肝癌中上调，其高表达与肝癌患者预后不良相关；ACSL6在肝癌中促进肿瘤生长和转移，而不依赖于其酶活性。为了研究ACSL6促进肝癌进展的机制，作者进行了质谱分析和共免疫沉淀实验，发现IL-18R1在肝癌细胞中与ACSL6相互作用，这种相互作用在IL-18刺激下得到加强，并且不依赖于ACSL6酶活性。进一步探究ACSL6与IL-18R1相互作用的机制，发现ACSL6和IL-18R1在细胞膜上共定位并相互作用，IL-18刺激诱导ACSL6易位到膜上，与IL-18R1形成复合物。IL-18R1作为IL-18的受体，将IL-18信号从细胞外传递到细胞内，激活NF-κB通路。进一步实验发现ACSL6在IL-18刺激下激活了NF-κB信号通路，ACSL6通过募集IL-18RAP，增强IL-18R1与IL-18RAP之间的相互作用，从而激活IL-18R1-NF-κB信号通路，促进肝癌细胞的增殖和迁移。

2、IL-18诱导ACSL6 pS674易位，从而激活IL-18R1-NF-κB信号通路

IL-18刺激导致ACSL6和IL-18R1相互作用和ACSL6膜定位的机制尚不清楚。磷酸化是一个重要的翻译后修饰，在信号级联中调节蛋白质功能或亚细胞位置。为了确定ACSL6是否在IL-18刺激下发生翻译后修饰，作者检测了ACSL6的磷酸化、泛赖氨酸甲基化和泛赖氨酸乙酰化。结果表明，在IL-18刺激下，只有ACSL6的丝氨酸磷酸化增加。进一步实验发现ACSL6 S674磷酸化（pS674）通过促进IL-18R异源二聚体形成来调节IL-18信号传导的适配器功能。接下来，作者研究了ACSL6 pS674的激酶，ERK1/2抑制剂能减弱IL-18诱导的ACSL6 pS674，ACSL6与ERK2结合，但不与ERK1结合。体外激酶测定发现ERK2能直接磷酸化ACSL6 pS674，表明ERK2是ACSL6 pS674所必需的。进一步结果表明ACSL6作为连接IL-18信号和NF-κB激活的适配器，促进肝癌的进展。

3、ACSL6 pS674促进TANs和TAMs的募集，从而促进IL-18介导的肿瘤免疫逃逸

作者推测ACSL6可能参与了IL-18介导的免疫逃避。通过查询TCGA数据库中肝癌患者的公开转录组数据，发现ACSL6与CD8⁺ T细胞水平呈负相关，可能在肝癌中促进免疫逃避。进一步研究ACSL6 pS674是否会影响微环境中ACSL6可能的肿瘤细胞外源性功能，发现ACSL6抑制CD8⁺ T细胞的浸润和活化。免疫抑制细胞，如肿瘤相关中性粒细胞（TANs）和肿瘤相关巨噬细胞（TAMs），已被报道通过抑制CD8⁺ T细胞的浸润和活化来诱导免疫抑制作用并促进肿瘤进展。作者研究了TANs和TAMs在TME中的浸润，发现ACSL6 pS674是TANs和TAMs募集所必需的，从而促进肝癌的免疫逃逸并促进肿瘤进展。为了验证ACSL6在肿瘤免疫逃避中的作用，作者建立了肝癌小鼠，并注射靶向Acsl6基因的AAV8-miR30-shRNA（AAV8-shAcsl6）以敲低Acsl6的表达。结果发现在肝癌小鼠中注射AAV8-shAcsl6的可阻断肿瘤进展，肝脏重量、肝脏重量/体重比和肿瘤数量均下降，而过表达Acsl6的小鼠出现了大量的肿瘤负荷。Acsl6的下调促进了CD8⁺ T细胞的浸润，抑制了TANs和TAMs的募集，Acsl6过表达显著降低CD8⁺ T细胞浸润，增加TANs和TAMs募集，提示Acsl6促进肿瘤免疫逃避。

本研究发现ACSL6在肝癌发病机制中是一个潜在的关键致癌因子。ACSL6促进IL-18介导的肿瘤生长、转移和免疫逃避，独立于其代谢酶活性。机制上，在IL-18刺激下，ACSL6在S674位点被ERK2磷酸化，并招募IL-18RAP与IL-18R1相互作用，从而增强IL-18R1-IL-18RAP异源二聚体，触发NF-κB依赖性基因表达，促进肿瘤发展。